椿根皮中化合物的分离与鉴定

椿根皮中化合物的分离与鉴定

论文摘要

目前中药的现代化研究大多取得了瞩目进展,多数常用中药明确了主要有效成分,部分弄清了化学结构,建立了中药药理学。但在中药药理作用的研究和开发方面相对薄弱,对中药的进一步开发和利用有限制作用。因此对中药中有效成分的提取与分离已经成为目前中药领域中的一项重要内容,在传统的提取方法中存在周期长,操作繁琐等缺陷。本实验主要利用高效液相色谱法(HPLC)、高速逆流色谱法(High-Speed Counter-Current Chromatography, HSCCC)等现代分离技术对中药进行提纯,具有周期短、效率高、产物纯度高等优点,也为新化合物的发现奠定了技术基础。臭椿(Ailanthus Altissima)为苦木科樗树属落叶乔木,因叶基部腺点发散臭味而得名。其化学成分多富含生物碱和三萜类化合物,另外也可分离得到一些黄酮类化合物及其他化学成分,这些化合物作为天然产物的活性成分具有广泛的药用价值,例如抗癌活性和抑菌活性等。因此如何采用合理有效的方法提取臭椿中的化学成分,及臭椿中新物质的发现和研究已倍受关注。本文利用现代分离技术对臭椿水相中的微量化合物及臭椿沉淀中有效成分进行了分离和提取,此法对于成分复杂的中药研究具有重要意义,也为中药中微量新化合物的提取提供了技术依据。本实验采用乙醇提取法对椿根皮进行回流提取,所得提取液用水溶解将其分为水相和沉淀相。首先利用大孔树脂法对水相总粗提物进行分段富集,将其中50%甲醇梯度洗脱液利用高效液相色谱法进行分离纯化,得到5种单体化合物,其结构均由质谱(MS)和核磁共振(NMR)氢谱、碳谱鉴定分别为臭椿苦酮7.5mg、臭椿辛内酯6.3mg、淫羊藿苷E55.5mg、铁屎米铜糖苷类化合物6.2mg、β-卡波啉生物碱5.8mg,纯度分别为97.8%、98.9%、98.4%、97.1%、99.1%。其中β-卡波啉生物碱为新发现化合物。再利用HSCCC对椿根皮沉淀相粗提物进行分离纯化,本实验是以石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水(5: 5: 4: 5)作为高速逆流色谱的两相溶剂系统,以此条件成功地从椿根皮沉淀中得到3种单体化合物,其结构均由质谱(MS)和核磁共振(NMR)氢谱、碳谱鉴定分别为β-卡波啉生物碱12.1mg、生物碱1-hydroxycanthin-6-one 10.2mg、铁屎米-6-酮10.6mg。纯度分别为98.2%、99.6%、96.8%。

论文目录

  • 摘要
  • Abstract
  • 绪论
  • 1.1 椿根皮概况
  • 1.1.1 臭椿属植物的分布及分类
  • 1.1.2 臭椿的形态特征
  • 1.1.3 臭椿属的化学成分
  • 1.1.4 臭椿属的主要药理作用
  • 1.2 椿根皮中主要化学成分
  • 1.2.1 苦木苦素类化合物
  • 1.2.2 生物碱类化合物
  • 1.2.3 其他化学成分
  • 1.3 中药分离技术简介
  • 1.3.1 硅胶柱层析法
  • 1.3.2 高效液相色谱法
  • 1.3.3 高速逆流色谱法
  • 1.4. 本研究的目的及意义
  • 2 高效液相色谱法提取椿根皮中强级性化合物
  • 2.1 仪器、试剂与材料
  • 2.1.1 仪器
  • 2.1.2 试剂
  • 2.1.3 中药
  • 2.1.4 基本实验器材
  • 2.2 实验方法
  • 2.2.1 椿根皮粗提物的制备
  • 2.2.2 样品处理
  • 2.2.3 色谱条件
  • 2.2.4 质谱条件
  • 2.3 结果与分析
  • 2.3.1 椿根皮粗提物分离组分的选择
  • 2.3.2 制备型HPLC 分离纯化结果
  • 2.3.3 制备后HPLC 分离纯化结果
  • 2.3.4 结构鉴定
  • 2.4 讨论
  • 2.4.1. HPLC 的分析条件的优化
  • 2.4.2. 微量化合物研究意义
  • 2.5 小结
  • 3 高速逆流色谱法分离纯化弱极性椿根皮粗提物中的化合物
  • 3.1 仪器、试剂与材料
  • 3.1.1 仪器
  • 3.1.2 试剂
  • 3.1.3 中药
  • 3.1.4 基本实验器材与第二章相同
  • 3.2 实验方法
  • 3.2.1 样品准备
  • 3.2.2 体系分配系数的测定
  • 3.2.3 溶剂体系和样品溶液的制备
  • 3.2.4 HSCCC 分离纯化的过程
  • 3.2.5 HPLC 色谱条件
  • 3.3 结果与分析
  • 3.3.1 椿根皮沉淀粗提物分离方法的选择
  • 3.3.2 高速逆流色谱分离体系的选择
  • 3.3.3 HSCCC 分离纯化的结果
  • 3.3.4 HPLC 的分析结果
  • 3.3.5 结构鉴定
  • 3.4 讨论
  • 3.4.1 HSCCC 两项体系及分配系数的选择
  • 3.4.2 改变转数和流速对分离效果的影响
  • 3.5 小结
  • 结论
  • 主要创新点
  • 参考文献
  • 附录A 谱图
  • 攻读硕士学位期间发表学术论文情况
  • 致谢
  • 相关论文文献

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