论文摘要
第一部分交通相关细颗粒物对CEM-6T细胞凋亡的诱导作用目的:探讨交通相关细颗粒物污染对CEM-6T细胞凋亡的诱导作用。方法:四甲基偶氮唑兰（MTT）比色法测定交通相关细颗粒物对CEM-6T细胞增殖功能的影响；AO/EB荧光探针观察PM2.5作用下CEM-6T细胞形态学的改变；FITC -AnnexinV/PI染色流式细胞仪测定交通相关细颗粒物染毒CEM-6T细胞的早期凋亡和坏死；RT-PCR测定CEM-6T细胞caspase-3的mRNA表达。结果:160（48h除外）、320、800μg/mLPM2.5染毒细胞24h和48h可抑制细胞增殖功能，与对照组比较差异有统计学意义（P<0.05）；AO/EB染色法发现，被染成红色的晚期凋亡和坏死细胞随着染毒剂量增加逐渐增多；经FITC-Annexin V / PI染色流式细胞仪测定，320μg/mLPM2.5染毒细胞24h后，细胞早期凋亡比生理盐水组升高，20μg/mL、80μg/mL、320μg/mL PM2.5染毒细胞48h，细胞早期凋亡比生理盐水组升高，320μg/mL PM2.5染毒细胞24h和48h，细胞坏死比生理盐水组升高，差异有统计学意义（P<0.05）；20μg/mL、80μg/mL、320μg/mL PM2.5染毒细胞24h和48h，细胞caspase-3比生理盐水组升高，差异有统计学意义（P<0.05）。结论:交通相关的细颗粒物对CEM-6T细胞增殖功能有抑制作用，可诱导CEM-6T细胞凋亡。第二部分交通相关细颗粒物诱导CEM-6T细胞凋亡机制的探讨目的:探讨交通相关细颗粒物诱导CEM-6T细胞凋亡机制。方法:线粒体途径的测定，罗丹明123法检测交通相关细颗粒物染毒CEM-6T细胞线粒体膜电位的改变用，Western Blot测定交通相关细颗粒物染毒CEM-6T细胞Caspase-9、Cyt-c蛋白表达；死亡受体途径的测定，Western Blot测定交通相关PM2.5染毒CEM-6T细胞Fas-L、Caspase-8、TNF-α蛋白表达。结果:160、320μg/mLPM2.5染毒细胞24h与80、160、320μg/mLPM2.5染毒48h细胞线粒体膜电位均低于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）；20（48h除外）、80、320μg/mL PM2.5染毒细胞24h和48h，Cyt-c/β-actin灰度比值比生理盐水组升高，差异有统计学意义（P<0.05）。20μg/mL、80μg/mL、320μg/mL PM2.5染毒细胞24h和48h，细胞Caspase-9/β-actin灰度比值比生理盐水组升高，差异有统计学意义（P<0.05）。20μg/mL（48h除外）、80μg/mL、320μg/mL PM2.5染毒细胞24h和48h，细胞Fas-L/β-actin灰度比值比生理盐水组升高，差异有统计学意义（P<0.05）。80μg/mL、320μg/mL PM2.5染毒细胞24h和48h，细胞Caspase-8/β-actin灰度比值比生理盐水组升高，差异有统计学意义（P<0.05）。20μg/mL（48h除外）、80μg/mL、320μg/mL PM2.5染毒细胞24h和48h，细胞TNF-α/β-actin灰度比值比生理盐水组升高，差异有统计学意义（P<0.05）。结论:线粒体途径和死亡受体途径均参与交通相关细颗粒物诱导CEM-6T细胞凋亡。