骨桥蛋白在原发性肝癌诊断及治疗中的应用研究

论文摘要

【目的】探讨骨桥蛋白（Osteopontin, OPN）在肝细胞癌（Hepatocellular Carcinoma，HCC）组织中的表达情况与临床病理因素的关系；探讨血浆OPN作为HCC生物标志物的应用价值；探讨抗OPN抗体对人肝癌HCCLM3细胞裸鼠移植瘤生长、转移和血管生成的抑制作用及对放疗的增敏作用。【方法】1.第一部分，采用S P免疫组织化学法检测OPN在70例肝癌组织、15例肝硬化组织和10例正常肝组织中的表达情况。2.第二部分，应用ELISA法检测70例HCC患者、65例慢性肝脏疾病（Chronic Liver Diseases，CLD）患者及65名健康人血浆OPN及甲胎蛋白（Alpha-fetoprotein，AFP）浓度。3.第三部分，74只裸鼠右侧背部皮下接种肝癌细胞株HCCLM3，次日随机取50只裸鼠随机分为5组每组10只：A组尾静脉注射生理盐水，B组尾静脉注射非特异性抗体，C、D、E组分别尾静脉注射抗OPN抗体5mg/kg、10mg/kg、20mg/kg，每周两次。每两天观察肿瘤体积变化，第10周末处死裸鼠，收集肿瘤组织、肺组织进行病理组织学检查，用免疫组化法测肿瘤微血管密度（Microvesseldensity，MVD）。其余24只裸鼠随机分为4组：F组尾静脉注射生理盐水、G组肿瘤局部以6MeV电子线照射、H组尾静脉注射抗OPN抗体20mg/kg、I组尾静脉注射抗OPN抗体20mg/kg+肿瘤局部6MeV电子线照射。观察肿瘤体积变化，比较各组的肿瘤体积、抑瘤率，利用增敏系数（Enhancement Factor, EF）评价抗OPN抗体对放疗的增敏作用。【结果】1.在肝癌组织中OPN的表达水平显著高于肝硬化组织及正常肝组织（P<0.001）；且OPN在肝癌组织中的高表达与肿瘤包膜不完整（P=0.044）及早期转移、复发（P=0.003）显著相关。2. HCC组血浆OPN浓度（中位数975ng/ml，范围131-5920）明显比CLD组（352ng/ml，18-1875）或健康人组（103ng/ml，8-984）高（P<0.001）。在HCC组，随着患者血浆OPN浓度的升高，Child-Pugh分级及肿瘤分期也随之升高，并且血浆OPN浓度与肿瘤包膜的完整性相关（P<0.05）。OPN诊断HCC的敏感度、特异度及临界值分别为87.1%、75.4%、642.5ng/ml。OPN曲线下面积（0.872）比AFP（0.817）大（P<0.01）。3.与A、B对照组相比5mg/kg、10mg/kg、20mg/kg各剂量的抗OPN抗体均能明显抑制肿瘤的生长（P﹤0.01）、降低血管密度（P﹤0.05）、减少肺转移（P﹤0.05），其中以20mg/kg剂量组最明显。在放疗的实验中，联合组I组局部肿瘤生长受到明显抑制，抑瘤率为41.67%，明显高于单纯放疗G组（24.04%，P﹤0.01）和抗OPN抗体H组（11.86%，P﹤0.01）。EF﹥1，提示抗OPN抗体对移植瘤有放疗增敏作用。【结论】1. OPN在肝癌组织中显著高表达，且与肿瘤包膜完整性，早期复发、转移密切相关。2.血浆中OPN浓度可以作为诊断HCC潜在的参考分子指标之一。3.抗OPN抗体能明显抑制肿瘤的生长、转移、血管生成，并能提高肝癌对放疗的敏感性。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一部分 肝癌组织中骨桥蛋白的表达与临床病理因素的相关性研究
• 引言
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 第二部分 血浆骨桥蛋白检测对肝癌诊断意义初步分析
• 引言
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 第三部分 抗骨桥蛋白抗体抑制HCCLM3裸鼠移植瘤的生长并增强其对放疗的敏感性
• 引言
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 致谢
• 综述
• 参考文献