本文主要研究内容
作者陶腾州（2019）在《刺参肠道源抗菌肽的分离、纯化及抗菌活性研究》一文中研究指出：本文以新鲜刺参(Apostichopus japonicas)肠道为原材料,以多肽粗提物得率和抗菌活性为指标,采用甲醇浸提法和乙酸溶液浸提法提取仿刺参肠道中的多肽。选用单因素以及正交实验法优化提取参数,得到浸提参数的最佳值。采用切向流膜包超滤技术制备出4组不同分子量范围的多肽,并检测其对大肠埃希氏菌(Escherichia coli)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)、鳗弧菌(Vibrio anguillarum)、副溶血弧菌(Vibrio Parahaemolyticus)和哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)的抗菌活性。使用Sephadex G-25柱层析进行分离纯化,并对所得组分抗菌活性进行检测,最后使用高效液相色谱仪(HPLC)对所得具有抗菌活性的多肽进行分析。实验结果如下:1.刺参肠道抗菌肽的提取方法和工艺条件的优化以粗提物得率为指标,采用单因素和正交试验对甲醇和乙酸浸提法进行优化,所得最佳提取条件,甲醇浸提法为:料液比0.3 g/mL、浸提液浓度80%、浸提时间24h、离心转速8000 r/min,正交所能取得的最高得率为8.33%。乙酸浸提法为:料液比0.2 g/mL、浸提液浓度7%、浸提时间24 h、离心转速8000 r/min。正交所能取得的最高得率为7.41%。粗提物多肽含量测定结果:甲醇组为3.26 mg/mL,乙酸组为2.62 mg/mL。2.粗提物超滤结果分析及抗菌活性的测定采用切向流超滤系统将甲醇和乙酸粗提物分别分成4个分子量多肽组,分别为:<1kD、1~3kD、3~5kD、5~10kD,发现3kD以上组需通过4次超滤方可将不同分子量大小的多肽分开,3kD以下组则需要至少5次超滤才能将不同分子量的多肽分开。采用比浊法测试甲醇和乙酸超滤组不同分子量组的多肽对7种细菌的抑菌活性,绘制各个细菌24 h的生长曲线,得到各分子量组多肽的抗菌活性。结果表明:小于1kD的甲醇超滤组多肽在甲醇和乙酸各分子量超滤多肽组中的抑菌谱最广,抗菌活性最强。3.葡聚糖凝胶G-25层析纯化分析及抗菌活性测定对超滤后抗菌活性最强样品组进行Sephadex G-25层析纯化,经洗脱得到3种成分,分别记为P1、P2、P3。对得到的3种洗脱成分使用抑菌圈法和比浊法进行抗菌活性的测定,结果表明:P2对大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、副溶血弧菌和鳗弧菌的抑菌圈直径为16.5 mm、15.7 mm、14.6 mm、13.9 mm、15.1mm,最低抑菌浓度(MIC)为1000μg/mL、1000μg/mL、2000μg/mL、3000μg/mL、2000μg/mL,P1与P3无抗菌活性。同时,分析了加热时长、加热温度及冻融次数对P2抗菌活性的影响,结果显示:加热时长及温度对P2影响不显著,冻融次数对P2影响显著;Tricine-SDS-PAGE电泳结果显示:P2在分离胶上为单一条带,分子量为4.5kD;最后通过HPLC对P2成分进行分析,结果显示P2由5种物质构成。
Abstract
ben wen yi xin xian ci can (Apostichopus japonicas)chang dao wei yuan cai liao ,yi duo tai cu di wu de lv he kang jun huo xing wei zhi biao ,cai yong jia chun jin di fa he yi suan rong ye jin di fa di qu fang ci can chang dao zhong de duo tai 。shua yong chan yin su yi ji zheng jiao shi yan fa you hua di qu can shu ,de dao jin di can shu de zui jia zhi 。cai yong qie xiang liu mo bao chao lv ji shu zhi bei chu 4zu bu tong fen zi liang fan wei de duo tai ,bing jian ce ji dui da chang ai xi shi jun (Escherichia coli)、jin huang se pu tao qiu jun (Staphylococcus aureus)、ku cao ya bao gan jun (Bacillus subtilis)、la yang ya bao gan jun (Bacillus cereus)、man hu jun (Vibrio anguillarum)、fu rong xie hu jun (Vibrio Parahaemolyticus)he ha wei shi hu jun (Vibrio harveyi)de kang jun huo xing 。shi yong Sephadex G-25zhu ceng xi jin hang fen li chun hua ,bing dui suo de zu fen kang jun huo xing jin hang jian ce ,zui hou shi yong gao xiao ye xiang se pu yi (HPLC)dui suo de ju you kang jun huo xing de duo tai jin hang fen xi 。shi yan jie guo ru xia :1.ci can chang dao kang jun tai de di qu fang fa he gong yi tiao jian de you hua yi cu di wu de lv wei zhi biao ,cai yong chan yin su he zheng jiao shi yan dui jia chun he yi suan jin di fa jin hang you hua ,suo de zui jia di qu tiao jian ,jia chun jin di fa wei :liao ye bi 0.3 g/mL、jin di ye nong du 80%、jin di shi jian 24h、li xin zhuai su 8000 r/min,zheng jiao suo neng qu de de zui gao de lv wei 8.33%。yi suan jin di fa wei :liao ye bi 0.2 g/mL、jin di ye nong du 7%、jin di shi jian 24 h、li xin zhuai su 8000 r/min。zheng jiao suo neng qu de de zui gao de lv wei 7.41%。cu di wu duo tai han liang ce ding jie guo :jia chun zu wei 3.26 mg/mL,yi suan zu wei 2.62 mg/mL。2.cu di wu chao lv jie guo fen xi ji kang jun huo xing de ce ding cai yong qie xiang liu chao lv ji tong jiang jia chun he yi suan cu di wu fen bie fen cheng 4ge fen zi liang duo tai zu ,fen bie wei :<1kD、1~3kD、3~5kD、5~10kD,fa xian 3kDyi shang zu xu tong guo 4ci chao lv fang ke jiang bu tong fen zi liang da xiao de duo tai fen kai ,3kDyi xia zu ze xu yao zhi shao 5ci chao lv cai neng jiang bu tong fen zi liang de duo tai fen kai 。cai yong bi zhuo fa ce shi jia chun he yi suan chao lv zu bu tong fen zi liang zu de duo tai dui 7chong xi jun de yi jun huo xing ,hui zhi ge ge xi jun 24 hde sheng chang qu xian ,de dao ge fen zi liang zu duo tai de kang jun huo xing 。jie guo biao ming :xiao yu 1kDde jia chun chao lv zu duo tai zai jia chun he yi suan ge fen zi liang chao lv duo tai zu zhong de yi jun pu zui an ,kang jun huo xing zui jiang 。3.pu ju tang ning jiao G-25ceng xi chun hua fen xi ji kang jun huo xing ce ding dui chao lv hou kang jun huo xing zui jiang yang pin zu jin hang Sephadex G-25ceng xi chun hua ,jing xi tuo de dao 3chong cheng fen ,fen bie ji wei P1、P2、P3。dui de dao de 3chong xi tuo cheng fen shi yong yi jun juan fa he bi zhuo fa jin hang kang jun huo xing de ce ding ,jie guo biao ming :P2dui da chang ai xi shi jun 、jin huang se pu tao qiu jun 、ku cao ya bao gan jun 、fu rong xie hu jun he man hu jun de yi jun juan zhi jing wei 16.5 mm、15.7 mm、14.6 mm、13.9 mm、15.1mm,zui di yi jun nong du (MIC)wei 1000μg/mL、1000μg/mL、2000μg/mL、3000μg/mL、2000μg/mL,P1yu P3mo kang jun huo xing 。tong shi ,fen xi le jia re shi chang 、jia re wen du ji dong rong ci shu dui P2kang jun huo xing de ying xiang ,jie guo xian shi :jia re shi chang ji wen du dui P2ying xiang bu xian zhe ,dong rong ci shu dui P2ying xiang xian zhe ;Tricine-SDS-PAGEdian yong jie guo xian shi :P2zai fen li jiao shang wei chan yi tiao dai ,fen zi liang wei 4.5kD;zui hou tong guo HPLCdui P2cheng fen jin hang fen xi ,jie guo xian shi P2you 5chong wu zhi gou cheng 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自烟台大学的陶腾州，发表于刊物烟台大学2019-08-29论文，是一篇关于抗菌肽论文,刺参论文,肠道论文,纯化论文,抗菌活性论文,烟台大学2019-08-29论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自烟台大学2019-08-29论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。