论文摘要
【目的】通过检测缺氧诱导因子-1α（Hypoxia Induced Factor,HIF-1α）和粘附分子E-cadherin、integrinα5和integrinβ1在胰腺癌组织及人胰腺癌细胞株PANC-1中的表达,以及细胞侵袭力的变化,探讨HIF-1α对胰腺癌粘附分子调控作用及侵袭转移的影响。【方法】应用免疫组化（EnVision System）检测了34例胰腺癌和10例正常胰腺组织中HIF-1α、E-cadherin、integrinα5和integrinβ1的表达情况,分析这些指标的相互关系及与临床病理特点的关系。进一步对人胰腺癌细胞株PANC-1在不同缺氧培养时间下,采用RT-PCR和Western blot术检测HIF-1α、E-cadherin、integrinα5和integrinβ1的mRNA和蛋白表达变化;并用Matrigel胶检测人胰腺癌细胞侵袭转移能力的变化。应用YC-1阻断HIF-1α后对上述各指标的作用。分析缺氧时各指标的表达规律及与肿瘤细胞侵袭转移的关系。【结果】1 HIF-1α和粘附分子在胰腺癌组织中的表达及意义在胰腺癌组织中HIF-1α、E-cadherin、integrinα5和integrinβ1蛋白表达阳性率分别为76.47%、38.21%、47.06%、91.18%。HIF-1α和integrinβ1的表达明显高于正常胰腺组织（p <0.01和0.05）,而E-cadherin和integrinα5的表达明显低于正常胰腺组织（p <0.01）。在胰腺癌组织中HIF-1α表达与E-cadherin、integrinα5的蛋白表达呈负相关（r=-0.482,p <0.05;r=-0.434,p <0.05）;与integrinβ1的蛋白表达呈正相关（r=0.366,p <0.05）。在胰腺癌组织中HIF-1α表达与肿瘤大小、临床分期及淋巴结转移有关（p <0.05）;E-cadherin、integrinα5和integrinβ1与肿瘤临床分期和淋巴转移有关（p<0.05）,与肿瘤大小无关;上述各指标与患者年龄,性别及病理分级无关。2缺氧微环境对人胰腺癌细胞株PANC-1细胞HIF-1α及粘附分子表达和侵袭力的影响不同缺氧时间和HIF-1α抑制剂YC-1对PANC-1细胞的HIF-1α和integrinβ1的mRNA表达无明显变化;E-cadherin和integrinα5的mRNA的表达均随缺氧时间的延长而下降（P <0.05）,而应用YC-1后E-cadherin和integrinα5表达增强（P <0.05）。随着缺氧时间的延长, HIF-1α蛋白表达逐渐上升,缺氧24 h达到高峰（P <0.05）,加用YC-1缺氧培养后,PANC-1细胞HIF-1α蛋白表达与常氧培养相似;E-cadherin和integrinα5的蛋白表达均随缺氧时间的延长而下降（P <0.05）,加用YC-1缺氧培养后,两者的蛋白表达明显高于缺氧培养（P <0.05）,与常氧培养相似。HIF-1α与E-cadherin、integrinα5的蛋白表达呈负相关（r=-0.954 P <0.05;r=-0.951,P <0.05）;integrinβ1的蛋白于各缺氧时间段及应用YC-1后均高表达,与对照组相似。细胞侵袭力检测显示:随着缺氧时间延长,细胞侵袭能力增强（P <0.05）,而YC-1可抑制缺氧所致的细胞侵袭力增强（P <0.05）。【结论】1胰腺癌组织中HIF-1α和Integrinβ1呈高表达;E-cadherin和Integrinα5呈低表达。并且HIF-1α的表达与肿瘤大小、临床分期和淋巴结转移有关;E-cadherin、Integrinα5和Integrinβ1与肿瘤临床分期和淋巴结有关。提示HIF-1α、E-cadherin、Integrinα5和Integrinβ1在胰腺癌发展过程中起重要作用。2缺氧微环境可诱导PANC-1细胞株HIF-1α的蛋白高表达,而下调E-cadherin和Integrinα5的表达。加用YC-1抑制HIF-1α表达后,可阻断缺氧微环境对E-cadherin和Integrinα5表达的下调,提示缺氧微环境可通过HIF-1α下调E-cadherin和Integrinα5表达。3缺氧微环境可增强PANC-1细胞株的侵袭力,YC-1可抑制缺氧介导的PANC-1细胞株侵袭力的增强,缺氧可能通过HIF-1α下调E-cadherin和Integrinα5表达,而降低细胞间粘附力,促进胰腺癌的侵袭。