黄瓜及其它几种葫芦科植物内生真菌资源的初步研究

论文摘要

从北京郊区及附近地区的海淀、通州、大兴、河北廊坊等地的蔬菜基地,采集生长于露地和温室、普通生产基地和有机生产基地、栽培和自生等不同环境下的黄瓜及其它常见葫芦科蔬菜的植株样本,进行内生真菌的分离培养。对获得的具代表性的228株内生真菌进行形态学鉴定和rDNA ITS区域及18S部分区域的序列分析,共鉴定出13属真菌。其中黄瓜的内生真菌包括Fusarium oxysporum Schltdl.(尖孢镰刀菌)、Chaetomium globosumKunze(球毛壳菌)、Epicoccum nigrum Link(黑附球菌)、Myrothecium roridum Tode(露湿漆斑菌)、Trichoderma longibrachiatum Rifai(长枝木霉)、Trichoderma reesei Simmons(里氏木霉)、Alternaria alternata(Fr.)Keissl.(链格孢)、Cladosporium cladosporioides(Fresen.)de Vries(枝状枝孢)、Penicillium brevicompactum Dierckx(短密青霉)、Aspergillus ochraceusWilh.(棕曲霉)等11属20种,Fusarium oxysporum为优势种,占45.7%。甜瓜和丝瓜的优势种与黄瓜中的一样为Fusarium oxysporum,西瓜的优势种为Colletotrichum sp.(刺盘孢),南瓜和葫芦的优势种为Alternaria alternata。在研究过的样品中,Chaetomium globosum和Epicoccum nigrum只在黄瓜上发现,Exserohilum rostratum(Dreehsler)K.J.Leonard&Suggs(嘴突突脐蠕孢)只在西瓜和丝瓜中发现,Curvularia lunata(Wakker)Boedijn(弯孢)、Curvularia interseminata(Berk.&Ravenel)J.C.Gilman(间型弯孢)、Rhizoctonia sp.(丝核菌)分别只在南瓜、丝瓜和甜瓜中发现。Trichoderma longibrachiatum和Myrothecium roridum被首次作为内生菌报道,Epicoccumnigrum作为葫芦科植物内生菌也是首次报道。统计结果表明,露地栽培黄瓜中的内生真菌种类多于温室中的黄瓜,有机蔬菜基地黄瓜中的内生真菌种类多于普通蔬菜基地中的黄瓜。内生真菌的分离率以上部茎中最高,其次是根部和下部茎。在平板对峙试验中,1株尖孢镰刀菌对黄瓜菌核病菌(Sclerotiniasclerotiorum(Lib.)de Bary)表现较好的拮抗作用,1株长枝木霉对黄瓜多种病原菌均表现出较好拮抗作用,还有一些菌株对黄瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporum f sp.cucumerinumOwen.)表现出不同程度的拮抗作用。接种试验表明,由黄瓜植株分离得到的83.5%的内生尖孢镰刀菌菌株对黄瓜无致病性。接种再分离试验发现,尖孢镰刀菌可以在黄瓜的根、茎等部位定植,并表现一定优势。研究结果初步揭示了黄瓜和部分其它瓜类内生真菌概况,对其生物学功能及其相互间及与植物间的关系有了初步认识,为瓜类内生真菌资源的进一步研究和利用奠定了基础。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一章 引言
• 1.1 人类对植物内生真菌的认识
• 1.1.1 概念及分布研究
• 1.1.2 开发及应用研究
• 1.1.3 存在问题
• 1.2 植物内生真菌的生物学和生态学
• 1.2.1 内生真菌资源及生物学研究
• 1.2.2 植物内生微生态研究
• 1.2.3 植物-内生真菌相互作用研究
• 1.3 植物内生真菌的农业应用研究
• 1.3.1 促生作用研究
• 1.3.2 抑菌活性研究
• 1.3.3 抗虫作用研究
• 1.3.4 内生非致病真菌的应用研究
• 1.3.5 其它活性研究
• 1.4 植物内生真菌的分离及鉴定方法
• 1.4.1 植物内生真菌的分离
• 1.4.2 内生真菌形态鉴定
• 1.4.3 内生真菌分子鉴定
• 1.5 黄瓜及葫芦科植物内生真菌研究现状
• 1.6 本研究的目的和意义
• 第二章 葫芦科植物内生真菌的分离及鉴定
• 2.1 材料与方法
• 2.1.1 植物样品
• 2.1.2 试验用品及仪器
• 2.1.3 研究方法
• 2.2 结果与分析
• 2.2.1 分离方法比较
• 2.2.2 分离结果统计
• 2.2.3 菌种鉴定
• 2.3 讨论
• 2.3.1 分离方法
• 2.3.2 菌株纯化
• 2.3.3 菌株鉴定
• 2.3.4 西瓜内生真菌类群比较
• 2.3.5 黄瓜内生真菌类群分析比较
• 2.3.6 植物-内生真菌-环境的互作关系
• 第三章 植物内生真菌生物学功能的初步研究
• 3.1 材料与方法
• 3.1.1 试验材料
• 3.1.2 研究方法
• 3.2 结果与分析
• 3.2.1 供试菌株的抑菌谱的测定
• 3.2.2 供试菌株对黄瓜枯萎病菌的抑制作用
• 3.2.3 供试菌株对黄瓜菌核病病菌的抑制
• 3.2.4 供试菌株间的互作
• 3.3 讨论
• 3.3.1 抑菌谱的测定
• 3.3.2 抑菌活性的比较
• 3.3.3 植物内生真菌的回接方法
• 3.3.4 尖孢镰刀菌致病性测定
• 3.3.5 植物内生真菌之间的互作关系
• 第四章 结论
• 参考文献
• 致谢
• 作者简介