论文摘要
目的1.构建环氧化酶-2阳性表达的人鼻咽癌裸鼠异种移植瘤模型;2.研究塞来昔布在环氧化酶-2阳性表达的人鼻咽癌异种移植瘤模型的抑癌作用;3.探讨塞来昔布的抑癌作用机制,为鼻咽癌的治疗提供新的靶点。方法免疫组化法检测人鼻咽癌CNE1细胞系环氧化酶-2蛋白的表达水平。采用四甲基偶氮唑蓝法（MTT法）检测不同浓度和不同时间赛来昔布对CNE1细胞增殖的影响。用用阳性表达的CNE1细胞接种裸鼠,构建鼻咽癌裸鼠异种移植瘤模型。将构建的环氧化酶-2阳性表达的人鼻咽癌裸鼠异种移植瘤模型,按随机数字表法分为2组:⑴空白对照组,⑵赛来昔布组,每组8只。治疗组饮含赛来昔布（100mg/KG）的混悬液,定期观察小鼠精神状态,饮食及排便情况,用游标卡尺测量肿瘤结节的长度（a）宽度（b）计算体积,绘制肿瘤生长曲线,并检测肿瘤从6mm生长至16mm所需时间。所有移植瘤最大径达到16mm后麻醉处死裸鼠,手术切除肿瘤组织,并采用免疫组化和逆转录-聚合酶链反应法（RT-PCR）检测裸鼠移植瘤组织中COX-2,血管内皮生长因子,survivin的表达。结果1.免疫组化SP法在CNE1细胞中均检测到环氧合酶-2蛋白的表达。2.塞来昔布对人鼻咽癌细胞株生长的抑制作用呈时间、剂量依赖性效应。3.移植瘤最大径从6mm长至16mm所需的时间,单用塞来昔布组（54.63±7.11d）大于空白对照组（45.25±7.80）,经t检验,两组间差异有显著意义（P=0.025）。4.对照组免疫组化检测COX-2、VEGF、survivin的表达值分别是4.50±0.93, 4.63±1.06, 5.13±1.13.而在塞来昔布组分别是3.25±1.28,2.88±1.13,3.13±1.13。两组相比较,COX-2、VEGF、survivin的表达差异有显著性（P<0.05）。5. .对照组RT-PCR检测COX-2、VEGF、survivin的表达灰度值分别是0.28±0.09, 0.23±0.05, 0.42±0.06;而在塞来昔布组分别是0.17±0.05,0.15±0.05,0.30±0.08。两组相比较,COX-2、VEGF、survivin的表达差异有显著性（P<0.05）。结论1.塞来昔布对环氧合酶-2阳性表达的人鼻咽癌细胞及裸鼠异种移植瘤模型均具有抗癌作用。2.塞来昔布能降低移植瘤组织的环氧合酶-2蛋白表达量,组织中VEGF、survivin也有所降低。据推测,塞来昔布可能通过抑制环氧合酶-2蛋白活性,进而抑制VEGF,survivin的表达,以减少新生血管的形成及诱导细胞凋亡,抑制肿瘤的生长。