内脂素的表达与肥胖的相关性研究

论文摘要

目的:（1）通过检测内脂素基因在维吾尔族肥胖症患者皮下、网膜脂肪组织和血浆中的表达水平,分析其与体重指数、腰臀围比、空腹血糖、血脂等各因素的关系,探讨内脂素与维吾尔族肥胖及其相关疾病的关系。（2）利用3T3-L1细胞株作为体外实验模型,通过观察3T3-L1前脂肪细胞分化成熟过程中内脂素基因表达水平的变化,探讨内脂素在脂肪细胞分化、脂质合成和积聚过程中的作用。方法:根据2000年亚太地区成人肥胖分类标准（BMI≥25kg/m2为肥胖切入点）,将56名研究对象分为肥胖组和非肥胖组。应用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）的方法检测受试者皮下和网膜脂肪组织中内脂素mRNA表达水平,酶联免疫法检测血浆内脂素浓度。体外培养3T3-L1前脂肪细胞,在3T3-L1前脂肪细胞生长至完全汇合后2天,采用经典的鸡尾酒方法诱导其分化,油红O染色鉴定脂肪细胞分化情况,采用RT-PCR和Western blot的方法鉴定诱导分化不同时间段（0～12天）脂肪细胞中内脂素基因表达量。结果:（1）肥胖组与非肥胖组皮下和网膜脂肪组织内脂素mRNA表达水平比较,虽然差异无统计学意义,但有升高趋势;（2）肥胖组血浆内脂素浓度较正常非肥胖组显著升高（P<0.05）;（3）相关性分析显示,网膜脂肪组织内脂素mRNA表达量与BMI（r=0.26,P<0.05）和TG（r=0.55,P<0.05）显著正相关;皮下脂肪组织内脂素mRNA表达量与TG显著正相关（r=0.54,P<0.05）,血浆内脂素浓度与体重（r=0.38,P<0.05）、腰围（r=0.33,P<0.05）、臀围（r=0.27,P<0.05）均呈正相关,而与HDL-C呈负相关（r=-0.27,P<0.05）;（4）在3T3-L1前脂肪细胞分化过程中内脂素mRNA表达水平逐渐升高,至分化末期达到较高水平且趋于稳定。其中,诱导分化后第6～12天较分化第0～4天显著升高（P<0.05）,诱导分化第10～12天较第6天显著升高。诱导分化第12天较第8天显著升高。（5）免疫印迹结果显示,随着脂肪细胞的成熟内脂素蛋白水平的表达升高。结论:内脂素可能与维吾尔族肥胖及脂代谢有关,体外实验证实内脂素与脂肪细胞分化和脂质积聚有密切的关系。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 前言
• 材料与方法
• 1. 材料
• 1.1 临床资料及标本的采集
• 1.2 主要试剂及其配制方法
• 1.3 本研究所使用的主要仪器
• 2. 方法
• 2.1 组织取材和指标检测
• 2.2 细胞试验
• 2.3 Western blot 实验
• 结果
• 讨论
• 小结
• 致谢
• 参考文献
• 综述
• 攻读硕士学位期间发表的学术论文
• 导师评阅表