论文题目: 三种生物工程产品对动物的安全性影响研究
论文类型: 博士论文
论文专业: 基础兽医学
作者: 赵志辉
导师: 邹思湘
关键词: 转基因耐盐碱水稻,转基因抗草苷麟豆粕,大鼠,代谢物,重组猪生长激素
文献来源: 南京农业大学
发表年度: 2005
论文摘要: 1 转基因水稻安全评价中内源基因研究 通过查阅有关数据库选取相应的水稻单拷贝基因SPS,在网上BLAST比对该基因序列与其他作物基因序列的同源性情况,从而确定一段在水稻中相对保守而在其他作物中几乎没有同源序列的基因,将该基因作为水稻内标准基因的候选基因,设计相应的定性定量引物和探针,通过定量与定性PCR检测和Southern检测,确定可以用于转基因水稻安全性评价过程中PCR检测的水稻内源基因SPS(sucrose phosphate synthase)。实验分析了SPS基因在水稻中的种间特异性、种内非特异性和拷贝数,证明SPS基因完全适用于转基因水稻的安全性评价过程中外源基因水平转移PCR检测分析。 2 转基因水稻外源基因拷贝数检测研究 以水稻SPS基因作为内参照基因,利用TaqMan荧光定量PCR的方法,建立了转基因水稻外源GUS和HPT基因的拷贝数定量检测方法。通过GUS染色和定性PCR的方法从72个转基因水稻中筛选得到26个同时含有GUS和HPT基因的转基因水稻样品,同时设计了针对外源基因的引物和探针序列,并建立了相应的定量PCR反应体系,由定量PCR检测结果可知该外源GUS和HPT基因定量检测系统的灵敏度为10拷贝。利用相对定量的方法,分别绘制内源SPS基因和外源GUS、HPT基因的标准曲线,通过相同含量DNA中外源基因和内源基因拷贝数数目的比值来计算转基因的拷贝数。实验表明在26个检测样品中,单拷贝HPT基因和GUS基因分别有16个和9个,二拷贝分别为3个和9个,三拷贝均为3个,四拷贝及以上分别有4个和5个,其中有38%的检测样品发生了重排现象。分别选取了HPT基因和GUS基因拷贝数为单拷贝、二拷贝和三拷贝的转基因水稻样品各三份进行Southern检测。结果显示,83%的Southern结果与定量检测结果相符合。 3 转基因耐盐碱水稻饲喂大鼠安全性研究 选用150g左右SD大鼠32只,随机均分成两组。试验组饲喂含30%转codA基因耐盐碱水稻的大鼠配合饲料,对照组饲喂含30%非转基因水稻的大鼠配合饲料,两组饲料均采用相同配方,各项营养指标和卫生指标均无明显差异,连续饲喂30d。结果表明试验组体增重和对照组相比无显著差异(P>0.05),试验组大鼠血清中生长激素
论文目录:
摘要
英文摘要
引言
第一部分 文献综述
第一章 转基因植物安全性评价
1．1 转基因植物发展概况
1．2 转基因植物的安全性问题
1．3 转基因植物可能存在的潜在风险
1．4 转基因植物食品安全性评价原则
1．5 转基因植物安全性评价方法
1．6 转基因植物的检测
1．7 转基因水稻和转基因大豆
参考文献
第二章 猪重组生长激素概况
参考文献
第二部分 实验研究
第一章 转基因水稻内标准基因及外源基因拷贝数检测研究
实验一 转基因水稻安全评价中内标准基因研究
实验二 转基因水稻外源基因拷贝数检测研究
第二章 转基因耐盐碱水稻对大鼠安全性影响研究
实验一 转基因耐盐碱水稻对大鼠生长、代谢产物和激素水平的影响
实验二 转基因耐盐碱水稻中外源基因在大鼠体内的转移研究
第三章 转基因抗草苷瞵大豆对大鼠安全性影响研究
实验一 转基因抗草苷瞵大豆对大鼠生长、代谢产物和激素水平的影响
实验二 转基因抗草苷瞵大豆中外源基因在大鼠体内的转移研究
第四章 肌注重组猪生长激素在血液和组织中的残留研究
实验一 猪肌注重组猪生长激素在血液和组织中的残留研究
第三部分 总体讨论
第四部分 全文结论
参考文献
致谢
附录一 在读博士期间主持或参加研究项目情况
附录二 在读博士期间发表的文章目录
附录三 有关原始数据
发布时间: 2005-07-19
参考文献
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